DWD-1 UV detector (high utendaji mbili beam mbili wavelength) kujengwa data usindikaji

Wave urefu mbalimbali: 254nm, 280nm (wakati huo huo kugundua), nyingine kati ya 254nm, 280nm-400nm spectrum line kuchagua wavelength mbili kwa wakati huo huo kugundua.

* DWD-1 vifaa sifa

Protein 280nm / 254nm mbili wavelength kipimo:

Molekuli ya protini ina amino asidi ya aromatic kama vile tyrosine, triane. Wana sifa ya kunyonya mwanga ultraviolet, kilele chake cha kunyonya katika wavelength 280nm, na thamani ya wiani wa mwanga wa kunyonya kilele ndani ya wavelength hii ni uwiano halisi na kiwango chake, hivyo inaweza kuwa msingi wa ubora wa protini, kipimo cha kiasi, kwa sababu hii, njia ya kunyonya ultraviolet katika wavelength 280nm kawaida hutumiwa kwa ufuatiliaji wa kuendelea wa kiwango cha protini katika mfumo wa analytics. Lakini kwa sababu ya maudhui tofauti ya tyrosine na triane ya protini mbalimbali, ili kupima kiasi sahihi, ni lazima kulinganisha bidhaa safi za protini zinazopimwa kama kiwango, au tayari kujua kiwango chake cha kupunguza kama kumbukumbu. Aidha, vitu vingi visivyo vya protini pia vina uwezo wa kunyonya chini ya urefu wa wimbi wa 280nm, ambayo inaweza kuingilia. Maathiri hayo ni makubwa zaidi hasa kwa asidi ya nyuklia (purine na pyrimidine). Kunywa kwa 280nm ni nguvu mara 10 (kwa gram) kuliko protini, lakini asidi ya nuclei ni nguvu zaidi kunywa kwa 254nm, na kilele chake cha kunywa ni karibu na 254nm. Kiwango cha kupunguza kwa asidi nucleic katika 254nm ni mara mbili kuliko 280nm,

Wakati protini ni kinyume chake, thamani ya kunyonya UV ya 280nm ni kubwa kuliko thamani ya kunyonya ya 254nm.

Kawaida：

Uwiano wa kunyonya mwanga wa protini safi: A280 / A254 "1.8

Asidi safi ya nyuklia: A280 / A254 0.5

Kwa hiyo, wakati asidi ya nuclei inapatikana wakati huo huo katika ufumbuzi wa protini (ambayo ni hivyo kwa mifumo mingi ya kibiolojia), OD254nm lazima ipimwa wakati huo huo, na OD280nm. Kisha kulingana na uwiano wa unyonyaji wa wavelengths mbili, maudhui halisi ya protini yalihesabiwa kwa njia ya formula ya uzoefu ili kuondoa athari za asidi nyuklia.

Kiwango cha protini = 1.45 × A280-0.74 × A254 (mg / ml)

Formula hii ya uzoefu imeanzishwa kwa njia ya data iliyopimwa na mchanganyiko wa viwango tofauti vinavyojulikana vya protini (yeast enanolase) na asidi nucleic (asidi nucleic ya yeast).